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工具顯微鏡的七種觀察方式
工具顯微鏡的明視野鏡檢是大家比較熟悉的一種鏡檢方式
,廣泛應(yīng)用于病理、檢驗(yàn),用于觀察被染色的切片,所有顯微鏡均能完成此功能。明視野
二.工具顯微鏡暗視野觀察(Dark field DF)
暗視野實(shí)際是暗場(chǎng)照明發(fā)。它的特點(diǎn)和明視野不同
,不直接觀察到照明的光線(xiàn),而觀察到的是被檢物體反射或衍射的光線(xiàn)。因此,視場(chǎng)成為黑暗的背景,而被檢物體則呈現(xiàn)明亮的象。暗視野的原理是根據(jù)光學(xué)上的丁道爾現(xiàn)象
,微塵在強(qiáng)光直射通過(guò)的情況下m..m 暗視野觀察所需要的特殊附件是暗視野聚光鏡
暗視野
三.工具顯微鏡的相差鏡檢法(Phase contrast PH)
在光學(xué)顯微鏡的發(fā)展過(guò)程中
,相差鏡檢術(shù)的發(fā)明成功,是近代顯微鏡技術(shù)中的重要成就。我們知道,人眼只能區(qū)分光波的波長(zhǎng)(顏色)和振幅(亮度),對(duì)于無(wú)色通明的生物標(biāo)本,當(dāng)光線(xiàn)通過(guò)時(shí),波長(zhǎng)和振幅變化不大,在明場(chǎng)觀察時(shí)很難觀察到標(biāo)本.相差顯微鏡利用被檢物體的光程之差進(jìn)行鏡檢
,也就是有效地利用光的干涉現(xiàn)象,將人眼不可分辨的相位差變?yōu)榭煞直娴恼穹?div id="d48novz" class="flower left">相差圖片
相差顯微鏡的基本原理是
,把透過(guò)標(biāo)本的可見(jiàn)光的光程差變成振幅差,從而提高了各種結(jié)構(gòu)間的對(duì)比度,使各種結(jié)構(gòu)變得清晰可見(jiàn)。光線(xiàn)透過(guò)標(biāo)本后發(fā)生折 射1. 環(huán)形光闌(annular diaphragm) 位于光源與聚光器之間
2. 相位板(annular phaseplate)在物鏡中加了涂有氟化鎂的相位板
1. A 相板:將直射光推遲1/4λ,兩組光波合軸后光波相加
2. B 相板:將衍射光推遲1/4λ,兩組光線(xiàn)合軸后光波相減
工具顯微鏡的相差原理
四.工具顯微鏡的微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)(Differential interference contrast DIC)
微分干涉鏡檢術(shù)出現(xiàn)于60年代
工具顯微鏡的原理;
微分干涉稱(chēng)鏡檢術(shù)是利用特制的渥拉斯頓棱鏡來(lái)分解光束。分裂出來(lái)的光束的振動(dòng)方向相互垂直且強(qiáng)度相等
微分干涉圖片
DIC顯微鏡的物理原理*不同于相差顯微鏡
這時(shí)兩束光的偏振面(x和y)仍然存在
工具顯微鏡的微分干涉原理圖
五.偏光顯微鏡(Polarizing microscope POL )
偏光顯微鏡的特點(diǎn)
偏光顯微鏡是鑒定物質(zhì)細(xì)微結(jié)構(gòu)光學(xué)性質(zhì)的一種顯微鏡
偏光顯微鏡的特點(diǎn)
雙折射性是晶體的基本特性
六.浮雕相襯工具顯微鏡(RC HMC )
1975年
2002年,到期
工具顯微鏡的原理
斜射光照射到標(biāo)本產(chǎn)生折射
特點(diǎn)
提高未染色標(biāo)本的可見(jiàn)性和對(duì)比度;
圖象顯示陰影或近似三維結(jié)構(gòu)而不會(huì)產(chǎn)生光暈;
可檢測(cè)雙折射物質(zhì)(巖石切片、水晶
可檢測(cè)玻璃,塑料等培養(yǎng)皿中的細(xì)胞,器官和組織;
聚光鏡的工作距離可以設(shè)計(jì)的更長(zhǎng);
RC物鏡也可用于明場(chǎng),暗場(chǎng)和熒光觀察
七:熒光顯微鏡(Fluorescence Microscopy FL)
熒光鏡檢術(shù)是用短波長(zhǎng)的光線(xiàn)照射用熒光素染色過(guò)的被檢物體
熒光圖象
工具顯微鏡的優(yōu)點(diǎn):
檢出能力高(放大作用)
對(duì)細(xì)胞的刺激小(可以活體染色)
能進(jìn)行多重染色
工具顯微鏡的用途:
物體構(gòu)造的觀察——熒光素
熒光的有無(wú)
、色調(diào)比較進(jìn)行物質(zhì)判別——抗體熒光等發(fā)熒光量的測(cè)定對(duì)物質(zhì)定性、定量分析
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